AMV обратная транскриптаза

Описание

Обратная транскриптаза со стабильностью при более высоких температурах
Обратная транскриптаза вируса птичьего миелобластоза (AMV RT) катализирует полимеризацию ДНК с использованием матричной ДНК, РНК или гибридов РНК:ДНК. Для этого требуется праймер (праймеры для ДНК более эффективны, чем праймеры для РНК), а также Mg 2+ или Mn 2+ . Фермент обладает внутренней активностью РНКазы H. Как неионогенные детергенты, так и сульфгидрильные соединения стабилизируют активность фермента in vitro.

Функции:
— Высокая концентрация: Кат. № M9004 содержит 600 единиц AMV RT в концентрации 20–25 ед./мкл.
— 5-кратный реакционный буфер: 250 мМ трис-HCl (pH 8,3 при 25°C), 250 мМ KCl, 50 мМ MgCl 2 , 2,5 мМ спермидина, 50 мМ DTT.
— Температурная стабильность: AMV RT является предпочтительной обратной транскриптазой для матриц с высокой вторичной структурой из-за ее стабильности при более высоких температурах реакции (37–58°C).
Применение:
— Синтез первой и второй цепи кДНК.
— Расширение праймеров и секвенирование РНК.
— ОТ-ПЦР. До 10 мкл реакции RT, содержащей AMV RT и прилагаемый буфер для реакций AMV RT, можно добавить к 50 мкл реакции ПЦР-амплификации, в которой используется ДНК-полимераза Taq . Если используется ДНК-полимераза GoTaq® или мастер-микс для ПЦР, на 50 мкл ПЦР можно добавить до 25 мкл RT-реакции. Хранить при температуре от -10 до -30°C.